MiR-367通过Wnt/β-catenin通路抑制成骨细胞增殖的研究
目的 探究MiR-367通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路对成骨细胞增殖的抑制作用.方法 培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后转染miR-367模拟物或抑制物,茜紊红染色观察成骨分化;培养新生大鼠成骨细胞,转染miR-367模拟物或抑制物、联合使用β-catenin激动剂SKL2001或抑制剂XAV939,采用MTT法检测细胞增殖活力,采用荧光定量PCR及Western blot检测β-catenin及成骨标志基因Runt2相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)的表达.结果 转染miR-367模拟物或抑制物后,BMSCs茜素红染色的OD570值与转染NC模拟物或抑制物比较差异无统计学意义(P>0.05);转染miR-367模拟物后新生大鼠成骨细胞MTS检测的OD490值及β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显低于转染NC模拟物,转染miR-367抑制物后新生大鼠成骨细胞MTS检测的OD490值及β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显高于转染NC抑制物(P<0.05);转染miR-367模拟物联合SKL2001处理后新生大鼠成骨细胞中β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显高于转染miR-367模拟物,转染miR-367抑制物联合XAV939处理后新生大鼠成骨细胞中β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显低于转染miR-367抑制物.结论 miR-367能够抑制成骨细胞的增殖、但不影响成骨细胞的分化,这一作用可能与抑制Wnt/β-catenin通路有关.
成骨细胞、细胞增殖、细胞分化、miR-367、Wnt/β-catenin通路
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R322.7+1(人体形态学)
2020-06-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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