SIRT1通过PI3K/AKT通路促进成骨细胞分化的相关机制研究
目的 通过研究沉默信息调节因子1 (Sirtuin 1,SIRT1)基因与PI3K-AKT通路相互作用,探讨SIRT1基因对成骨细胞分化的影响.方法 自Sprague Dawley大鼠乳鼠颅骨提取成骨细胞进行原代培养,细胞培养至3～4代时,将细胞随机分为对照组,白藜芦醇组,白藜芦醇+EX-527组.采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)检测白藜芦醇及EX-527对细胞毒性大小.碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红(alizarin red S)染色分别检测ALP水平和钙结节.免疫组织化学法观察Ⅰ型胶原的产生,用以判断细胞的分化情况.Western blot分别检测SIRT1,Runtrelated transcription factor 2(RUNX2),骨桥蛋白(OPN)蛋白表达水平以及磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinaseB,AKT)磷酸化水平.结果 白藜芦醇和EX-527对细胞增殖无影响(P＞0.05),细胞毒性小,ALP水平和钙结节在加入白藜芦醇后有明显上升,加入EX-527后显著下降.Ⅰ型胶原量在加入了白藜芦醇后上升,SIRT1含量降低也引起了Ⅰ型胶原量下降.成骨细胞分化相关因子RUNX2和OPN随SIRT1表达增高而增高(P＜0.01或P＜0.001),当SIRT1被抑制后,相关因子蛋白水平表达降低(P＜0.001).同时,磷酸化PI3K和AKT水平也呈现SIRT1依赖性地上调和下调(P＜0.05或P＜0.001).结论 SIRT1对大鼠成骨细胞分化的影响可能是通过PI3K-AKT通路进行调控.
白藜芦醇、沉默信息调节因子1、成骨细胞分化
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R322.7+1(人体形态学)
中国博士后科学基金资助2017M623215
2018-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
523-526,534
