10.3969/j.issn.1008-5572.2012.12.011
真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1在小鼠BMSCs中的表达及意义
目的 探讨含有基因成纤维细胞生长因子受体1显性负性分子(DN FGFRl)的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后的表达及意义.方法 体外分离培养C57/BL小鼠BMSCs,应用综合贴壁的方法纯化BMSCs.由阳离子脂质体介导将pcDNA3.1(+)DNFGFR1转入BMSCs中,用RT PCR法检测DNFGFRl mRNA的表达.结果 小鼠BMSCs原代培养24h后见细胞贴壁伴有伸展现象,细胞核清晰,10d左右细胞密度明显增加,细胞形成单层,融合率达80%,综合贴壁培养使BM-SCs更纯.转染组条带灰度值与β-actin比值(3.8)明显高于未转染组(0.5).结论 pcDNA3.1(+)DNFGFR1质粒能被导入BMSCs并得到表达,为研究FGFR1的功能奠定了实验基础.
骨髓间充质干细胞、显性负性作用、成纤维细胞生长因子受体1、基因表达、小鼠
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R683;R34(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
国家自然科学基金81171734;中国博士后科学基金面上项目20100481529
2013-02-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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