丝裂原活化蛋白激酶对大鼠成骨细胞TRPV6表达的影响

摘要：

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶对大鼠成骨细胞瞬时性受体电位香草精受体6(transient receptor poten-tial vanilloid receptor 6,TRPV6)表达的影响.方法 采用Wistar大鼠乳鼠,连续酶消化法提取成骨细胞并培养.根据组织形态学、改良Kaplow氏成骨细胞碱性磷酸酶染色、矿化结节茜素红染等方法进行鉴定.实验分组:a)正常对照组;b)PD组(PD98059 5 μmol/L;PD98059 10μmol/L;PD98059 20 μmol/L);c)SB组(SB203580 5μmol/L;SB20358010 μmol/L;SB203580 20μmol/L);d)PD+SB组(PD98059 5 μmol/L+SB203580 5/μmol/L;PD98059 10 μmol/L+SB203580 10 μmol/L;PD98059 20 μmol/L+SB203580 20 μmol/L).细胞计数法、MTT法检测细胞活性,RT-PCR检测成骨细胞TRPV6 mRNA.所得数据用x±s表示,采用t检验进行统计学分析.结果 随着PD98059和/或SB203580浓度的增加,细胞增殖活性有下降的趋势,二者联合作用时细胞活性低于二者单独作用.细胞计数法检测显示,PD98059与SB203580联合作用时,三种组合中细胞数均显著低于空白对照组,P<0.01;同时也明显低于二者单独作用组细胞数量.碱性磷酸酶染色显示,联合用药组较单独用药细胞数明显减少,细胞体积变小,突起狭长,ALP染色阳性颗粒减少,随药物作用浓度增加上述变化更加显著.茜素红染色显示,钙结节与对照组比较数量少、体积小;10、20μmol/L联合作用组,细胞数减少更加明显,无钙结节形成.SB203580与PD98059二者联合应用显著抑制TR-PV6 mRNA的表达,5 mmol/L联合作用组即可明显抑制,随着作用浓度增加TRPV6 mRNA的表达量逐渐减少.结论 p44/42途径阻断剂PD98059能抑制成骨细胞增殖,明显降低成骨细胞TRPV6 mRNA表达,减少钙结节形成.p38途径阻断剂SB203580能抑制成骨细胞增殖,明显降低成骨细胞TRPV6 mRNA表达,减少钙结节形成.PD98059与SB203580在抑制成骨细胞增殖、降低成骨细胞TRPV6 mRNA表达、减少钙结节形成的作用方面存在协同作用.

关键词：丝裂原活化蛋白激酶、瞬时性受体电位通道、信号传递

所属期刊栏目：17

分类号：Q813.1+1(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2011-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：710-715