EphA2通过调控Grb2表达参与肝癌细胞侵袭的机制探讨

摘要：

目的:检测促红细胞生成素肝细胞受体A2(EphA2)蛋白在肝细胞肝癌中的表达情况,探讨其参与调控肝癌细胞侵袭的可能内在机制.方法:培养人正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞株MHCC97H、Hep3B,通过siRNA干扰法下调肝癌细胞中EphA2、生长因子受体结合蛋白2(Grb2)的表达,分为三组:未处理组(未处理肝癌细胞)、对照组(加入对照siRNA)和siRNA干扰组(加入siRNA干扰EphA2或Grb2).通过Western blot法检测不同处理前后细胞中EphA2、Grb2蛋白的表达情况,Transwell小室检测细胞侵袭性.多组比较、组间比较分别采用单因素方差分析和LSD-t检验.结果:体外侵袭实验结果显示MHCC97H、Hep3B、HL-7702穿透细胞的数量分别为:(401±3)/10 HPF、(111±4)/10 HPF、(31±3)/10 HPF,人正常肝细胞与人肝癌细胞相比差异具有统计学意义(P<0.05).EphA2、Grb2蛋白在人正常肝细胞与人肝癌细胞中的相对表达量相比,差异均有统计学意义(P<0.05).siRNA法抑制细胞EphA2表达后,Hep3B和MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组穿透的细胞数量分别为:(111±4)/10 HPF、(108±5)/10 HPF、(53±3)/10 HPF和(405±5)/10 HPF、(399±4)/10 HPF、(155±7)/10 HPF,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001).检测EphA2蛋白在Hep3B、MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组中的相对表达量,siRNA干扰组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).siRNA抑制Grb2表达后,Hep3B和MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组穿透的细胞数量分别为:(109±3)/10 HPF、(107±4)/10 HPF、(56±4)/10 HPF和(403±4)/10 HPF、(402±4)/10 HPF、(163±5)/10 HPF,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001).检测Grb2蛋白在Hep3B和MHCC97H细胞未处理组、对照组、siRNA干扰组组中的相对表达量,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).siRNA抑制EphA2表达后,检测Grb2蛋白在Hep3B、MHCC97H细胞未处理组、对照组、siRNA干扰组中的相对表达量,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:EphA2参与调控肝癌细胞侵袭的内在机制可能是通过调控Grb2蛋白的表达实现的,据此,我们得出EphA2可作为治疗肝细胞肝癌的新靶点.

关键词：肝癌、促红细胞生成素肝细胞受体A2、生长因子受体结合蛋白2、侵袭

所属期刊栏目：29

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：陕西省卫生健康科研基金项目编号:2018D008

在线出版日期：2021-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：32-37