10.3969/j.issn.1672-4992.2019.20.004
转录因子E2F1对急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34的转录调控作用
目的:探讨转录因子E2F1对急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34的转录调控作用.方法:利用双荧光素酶报告基因检测系统及定点突变技术分析E2F1对MLAA-34基因启动子转录活性的影响.通过凝胶迁移实验(EMSA)和染色质免疫共沉淀(CHIP)实验,验证E2F1是否与MLAA-34启动子核心区直接特异性结合.构建E2F1真核表达载体和干涉载体,转染U937细胞,RT-PCR和Western Blot检测MLAA-34基因的转录和表达变化.结果:转录因子E2F1对MLAA-34基因表达具有调控作用,E2F1结合序列点突变后,相对荧光素酶活性升高(P<0.01),绿色荧光蛋白的表达增高.EMSA和ChIP实验,从细胞内、外水平分别证明E2F1可与MLAA-34启动子直接结合而发挥调控作用.在过表达试验中,E2F1的增加可下调MLAA-34的表达(P<0.05);在干涉试验中,E2F1的降低可上调MLAA-34的表达(P<0.05).结论:转录因子E2F1可与MLAA-34基因启动子上的转录调控区结合,并抑制急性单核细胞白血病细胞中MLAA-34基因的转录.
急性单核细胞白血病、MLAA-34、E2F1、转录调控
27
R733.71(肿瘤学)
国家自然科学基金资助8153000580
2019-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
3560-3565