人白介素-7重组蛋白的原核表达、纯化及活性测定

摘要：

目的：构建重组质粒 pET32a - hIL -7，诱导表达，纯化并鉴定目的蛋白。方法：将人白介素-7基因克隆到原核表达载体 pET32a（＋）上，得到重组质粒 pET32a - hIL -7，转化大肠杆菌 BL21（DE3），经 IPTG 诱导得到融合蛋白 Trx - hIL -7。融合蛋白主要以包涵体形式存在。包涵体通过复性、酶切、纯化等步骤处理。利用 Western blot 鉴定重组蛋白，对其生物学活性用其依赖性细胞株2E8增殖实验测定。结果：成功构建重组质粒 pET32a - hIL -7。包涵体通过透析复性，肠激酶切，镍柱纯化等步骤得到重组蛋白人 IL -7。纯化的重组蛋白经 Western blot 鉴定能与抗人的 IL -7抗体特异性结合。经体外细胞实验检测证明，纯化的重组蛋白具有生物学活性。结论：得到了有活性的重组蛋白 IL -7，为研究其功能奠定了基础。

关键词：重组人白细胞介素-7、原核表达、生物活性

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：川北医学院重点培育项目编号CBY13- A - ZP12

在线出版日期：2015-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3397-3400