雌激素受体GPR30 RNAi干扰载体的构建及在耐药乳腺癌细胞MCF-7R中的效果验证

摘要：

目的:采用 RNA干扰(RNAi)技术研究耐药乳腺癌细胞MCF -7R中GPR30表达方法:利用他莫昔芬( tamoxifen,TAM)诱导乳腺癌细胞MCF -7建立耐药乳腺癌细胞株.以GPR30为靶基因,pGenSil -1质粒为载体,根批GenBank数据库提供的GPR30基因核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil -1中,Lipofectin2000转染MCF-7R细胞,G418筛选获得阳性克隆细胞扩大培养.Tnzol法提取细胞总RNA,半定量RT - PCR检测GPR30的表达.结果:经TAM处理可以诱导GPR30 mRNA的表达,HindⅢ和EcoRⅠ双酶切鉴定重组干扰载体pGg30-1、pGg30 -2得到了与预期大小相符的片段,RT - PCR显示,未转染组MCF - 7R细胞GPR30mRNA的表达量明显高于转染pGg30 -1、pGg30-2的MCF - 7R细胞,而转染空载体组细胞未见明显变化.结论:RNAi技术可成功构建抑制GPR30表达的小干扰RNA重组体.

关键词：G蛋白偶联受体30、乳腺癌耐药、RNA干扰

所属期刊栏目：20

分类号：R730;R737.9(肿瘤学)

资助基金：陕西省科技计划项目2011K13-01-14

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：679-681