10.3969/j.issn.1672-4992.2009.05.007
重组腺病毒载体pAdBM5-GFP-hIL-2的构建及病毒滴度测定
目的:构建重组腺病毒载体pAdBM5-GFP-hIL-2,并测定病毒滴度.方法:从Jurkat细胞中提取mRNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增hIL-2基因全编码区序列.将测序正确的片段用Bgl II和Pme I双酶切定向插入到pAdBM5-GFP腺病毒载体中.通过磷酸钙共沉淀法将线性化重组质粒和腺病毒骨架共转染HEK293A细胞,扩增纯化重组腺病毒,TCID50法测定重组腺病毒滴度.结果:成功构建出表达hIL-2基因的重组腺病毒载体(pAdBM5-GFP-hIL-2),获得了高滴度表达hIL-2基因的重组腺病毒.结论:重组腺病毒表达载体(pAdBM5-GFP-hIL-2)的成功构建及重组腺病毒的获得有利于进一步开展肝癌的转基因治疗研究.
hIL-2、重组腺病毒载体、病毒滴度、pAdBM5-GFP
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R73-36+2(肿瘤学)
广西自然科学基金项目桂科自0640158
2009-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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