10.3969/j.issn.1672-4992.2007.03.002
SRG基因的克隆及原核表达
目的:克隆SRG基因、原核表达并鉴定.方法:从培养的人骨肉瘤细胞SOSP-9607中提取总RNA,经RT-PCR获得SRG基因.将该基因克隆到pGEM-T-Easy克隆载体中,测序、鉴定.将测序正确的SRG基因亚克隆到pET-28(a+)表达载体中,构建SRG表达载体,IPTG诱导表达2h~6h,做SDS-PAGE分析,鉴定SRG蛋白的表达.结果:DNA测序证明,获得了SRG基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致.SDS-PAGE分析表明,SRG蛋白获得高效表达,其相对分子质量为22kDa,表达量约占菌体总蛋白的25%.结论:SRG基因的克隆和表达均获得了成功,为进一步探讨SRG基因在骨肉瘤诊治中应用奠定了基础.
sRG基因、逆转录、PCR、基因表达
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R730.23(肿瘤学)
国家自然科学基金30330610
2007-04-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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