10.3969/j.issn.1672-4992.2006.04.004
人存活素cDNA的克隆和原核表达
目的克隆人存活素(survivin)编码区基因并在大肠杆菌中表达.方法采用RT-PCR法得到人存活素编码区cDNA,克隆入原核表达载体pRSETB,转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)PlyS,0.1mM β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后收集菌体蛋白,经SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定.结果获得人存活素编码区cDNA,构建原核表达载体pRSETB-survivin,转化菌株可表达人存活素蛋白,蛋白分子量约为20KD,蛋白表达量约为菌体总蛋白的13%.Western blot表明融合蛋白能与人存活素多克隆抗体特异性结合.结论获得人存活素编码区cDNA,并在大肠杆菌中表达了人存活素-组氨酸融合蛋白.
存活素、基因克隆、表达
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R730(肿瘤学)
2006-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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393-395