10.3969/j.issn.1000-7377.2023.09.002
长链非编码RNA YAF2-AS1通过调控微小RNA-141-3p表达抑制肝星状细胞活化实验研究
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)YAF2-AS1 在肝星状细胞活化中的作用及可能的分子机制.方法:采用基因表达数据库(GEO)分析YAF2-AS1在肝纤维化组织和正常肝组织中的表达.用YAF2-AS1质粒转染人肝星状细胞LX-2细胞并设为YAF2-AS1组,以转染阴性对照质粒为对照组.采用CCK-8 实验检测LX-2 细胞增殖.采用流式细胞术检测LX-2细胞周期分布和活性氧(ROS)含量.采用lncRMap软件和双荧光素酶活性实验验证YAF2-AS1与miR-141-3p的靶向关系.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-141-3p表达.采用Western blot检测蛋白磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路中PTEN、p-AKT 蛋白以及肝纤维化标志物[α 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ 型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、转化生长因子 β 受体 Ⅱ(T GFβR2)]的表达.结果:与正常肝组织比较,肝纤维化组织 YAF2-AS1 表达水平降低(P<0.01).与对照组比较,YA F2-AS1组LX-2细胞增殖活性被抑制(P<0.05);G0/G1 期LX-2细胞比例升高(P<0.01),S期和G2/M 期LX-2细胞比例降低(均 P<0.05);LX-2细胞ROS含量升高(P<0.01).miR-141-3p是YAF2-AS1的靶基因(P<0.01).与对照组比较,YAF2-AS1组LX-2细胞 miR-141-3p表达降低(P<0.01);PTEN蛋白表达增加,p-AKT、α-SMA、Collagen Ⅰ、TGFβR2蛋白表达降低(均 P<0.05).结论:YAF2-AS1 在肝纤维化组织中表达下调,过表达YA F2-AS1通过降低miR-141-3p表达抑制肝星状细胞的活化.
肝纤维化、长链非编码RNA、YAF2-AS1、微小RNA-141-3p、肝星状细胞、增殖
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R575.2(消化系及腹部疾病)
国家自然科学基金81870416
2023-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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