10.13339/j.cnki.sglc.20221021.016
不同剂量电离辐射对人γδT细胞体外增殖与细胞毒活性的影响
目的 探讨不同剂量电离辐射对人γδT细胞体外增殖与细胞毒活性的影响及其相关分子机制.方法 体外培养扩增人γδT细胞,第10天观察细胞形态特征,流式细胞术检测人γδT细胞百分含量.分别采用0.08、0.50、2.00、4.00、6.00 Gy X射线辐射入γδT细胞作为各辐照剂量组,以0.00 Gy组作为未辐射对照组.继续孵育24、48 h,收集细胞,在倒置相差显微镜下进行活细胞计数,乳酸脱氢酶释放法检测各组人γδT细胞对HepG2细胞的杀伤活性;流式细胞术检测各组穿孔素、颗粒酶B及CD107a的表达.结果 经10 d扩增后人γ8T细胞百分含量为81.22％±3.51％,经磁珠阳性分选纯化后γδT细胞百分含量为96.76％±1.37％.0.08 Gy剂量组人γδT细胞增殖最为显著,24 h的扩增倍数为1.32±0.07(P＜0.05),48 h的扩增倍数为2.22±0.11(P＜0.01);辐射后培养24 h的2.00 Gy剂量组、4.00 Gy剂量组人γδT细胞的杀伤活性分别为45.33％±3.22％、42.42％±3.54％,辐射后培养48 h的2.00 Gy剂量组、4.00 Gy剂量组人yδT细胞的杀伤活性分别为47.33％±3.81％、43.85％±3.39％,均显著高于未辐射对照组(分别P＜0.01、P＜0.05).2.00 Gy剂量组或4.00 Gy剂量组人γδT细胞在辐照后培养48 h,细胞胞内抗原穿孔素分别为85.88％±3.37％、82.96％±3.55％,均显著高于未辐射对照组(P＜0.01、P＜0.05);颗粒酶B表达分别为88.30％±4.26％、88.57％±3.92％,均显著高于未辐射对照组(P＜0.01);2.00 Gy剂量组人γδT细胞在辐照后培养48 h,细胞表面抗原CD107a表达为90.45％±2.56％,高于未辐射对照组(P＜0.01).结论 单次0.08 Gy电离辐射能够显著促进体外人γδT细胞增殖能力,单次2.00 Gy或4.00 Gy电离辐射可显著增强人γδT细胞对肝癌HepG2细胞的肿瘤杀伤活性;其机制可能与电离辐射促进人γδT细胞穿孔素、颗粒酶B及CD107a的表达相关.
电离辐射、不同剂量、γδT细胞、贴壁细胞、增殖活性、细胞毒活性
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R144.1;R392(放射卫生)
中国人民解放军原南京军区医学科技创新经费资助项目15MS045
2023-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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