云芝多糖增强人NK细胞杀伤功能的体外研究
目的 探讨云芝多糖(PSK)对体外培养的人自然杀伤(NK)细胞杀伤功能的影响.方法 采集健康成年人外周血,分离单个核细胞(PBMC),加入含白细胞介素(IL)-2的NK细胞培养液.培养第10天时加入不同质量浓度(100、75、50、25、10、5μg/mL)的PSK诱导NK细胞48 h,收集细胞检测.用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测诱导前后NK细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a及NKG2D受体表达(PSK诱导为实验组,同时设不加药物及无细胞的空白对照孔为对照组).通过CCK-8法检测对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性:取质量浓度25 μg/mL PSK诱导48 h后NK细胞,调整细胞浓度至1×109/L作为效应细胞;调整红白血病肿瘤细胞株K562细胞浓度至5×107/L,按效靶比为5∶1、10∶1、20∶1、40∶1、80∶1的比例混合培养于96板内,同时设单独效应细胞孔、单独靶细胞(实验组)和空白孔(对照组).结果 培养10d后NK细胞纯度达到78.70％左右.经PSK诱导48 h后,NK细胞的增殖及功能具有一定浓度依赖性,PSK质量浓度在25 μg/mL对NK细胞的增殖率(51.62％±3.20％)最为明显(P＜0.01),之后逐渐下降.在质量浓度0 ～ 100 μg/mL可以促进NK细胞的生长和增加NK细胞表面穿素、颗粒酶B、CD107a和NKG2D受体表达,以及增强对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性;尤其是当PSK质量浓度为25 μg/mL时,颗粒酶B、穿孔素、NKG2D和CD107a表达为55.42％±2.34％、70.49％±1.87％、83.45％±1.77％和85.00％±2.02％,显著高于对照组(25.83％±1.31％、40.79％±1.59％、70.66％±2.39％和72.79％±2.31％)(P＜0.01).在效靶比80∶1时,实验组杀伤活性为57.63％±3.42％,高于对照组(24.78％±2.47％)(P＜0.01).结论 PSK在一定质量浓度下能促进NK细胞的生长,且增强NK细胞的杀伤功能.
云芝多糖、NK细胞、细胞增殖、杀伤功能
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R318(医用一般科学)
南京军区医学科技创新重点项目14ZD17
2017-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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