大鼠Akt1基因真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达

摘要：

目的 构建Akt1基因真核表达载体pDC316-Akt1,观察其在293细胞(人胚肾母细胞)中的表达.方法 采用RT-PCR方法自大鼠肝组织总RNA中克隆Akt1 DNA片段,测序鉴定正确后,插入真核表达载体pDC316的EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ的酶切位点,构建Akt1真核表达载体Akt-pDC316,脂质体介导法转染293细胞,36h后Western blot检测转染293细胞中Akt1的含量.结果 经测序鉴定,构建的Akt1氨基酸序列与野生型Akt1序列完全相符.将Akt-pDC316转入293细胞,可见55000位置有Akt1的表达.经Western blot检测,具有良好的表达浓度.结论 构建Akt1基因真核表达载体在293细胞中可以充分表达.

关键词：Akt1、真核表达载体、293细胞

所属期刊栏目：11

分类号：R446(诊断学)

在线出版日期：2008-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：486-488