小分子化合物体外诱导肝上皮样干细胞-WB细胞表达PDX1

摘要：

目的:近年来干细胞治疗糖尿病一直是国内外研究人员关注的焦点,而肝细胞向胰岛样细胞转变也是热点之一.本实验应用小分子化合物在体外诱导WB-F344大鼠来源肝上皮样干细胞(简写WB细胞)表达胰腺内分泌前体细胞基因PDX1,建立一种体外诱导WB细胞分化为胰腺内分泌前体细胞的实验方法.方法:选用5-AZA TSA,RA,ITS等小分子化合物,分两步法直接诱导WB细胞分化为表达PDX1的胰腺内分泌前体细胞,用含有不同浓度5-AZA分化培养基诱导WB分化,摸索诱导分化的最佳条件.观察细胞形态变化,RT-PCR及实时定量PCR检测部分基因表达情况,免疫荧光检测PDX1的表达.结果:5AZA5 uM处理2d,TSA l d,RA联合ITS诱导7天,诱导的WB细胞表达PDX1较1-4 uM 5-AZA诱导强,并表达胰腺内分泌前体细胞的相关基因,NGN3,Neurod,NKX2.2,WB表达的Nestin仍持续表达,Insulinl有少量表达.WB表达的肝干细胞基因如ALB,AFP大量下调,标志分化的基因C/EBP下调.结论:5-AZA,TSA,RA,ITS等小分子化合物能够诱导肝上皮样细胞WB表达PDX1,并且这种诱导分化的细胞具有胰腺内分泌前体细胞特征.本实验进一步证明在体外微环境中,肝干细胞能向胰腺内分泌细胞转化,而肝细胞增极强,为将来干细胞治疗糖尿病提供充足的细胞来源

关键词：小分子化合物、WB细胞、PDX1、分化、糖尿病

所属期刊栏目：13

分类号：Q75;Q78;R587.1(分子遗传学)

资助基金：中国科学技术部和国家"863"计划项目2011AA020113;国家重点基础科学与发展计划2012CB518103;国家自然科学基金项目81071617和81001184

在线出版日期：2013-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2644-2649