鲈鱼IgM重链基因cDNA的克隆及其原核表达

摘要：

采用同源克隆和RACE技术扩增到鲈鱼(Lateolabrax japonicus)免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)重链(Heavy chain,H)基因全长cDNA序列.鲈鱼IgM cDNA全长为1901 bp,开放阅读框包含1749 bp,编码582个氨基酸.根据鲈鱼IgM和其他硬骨鱼免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸序列构建的系统发育树表明IgM、IgZ和IgD分别聚为一枝,其中IgM与IgZ 分支的进化关系较近,而与IgD分支的进化关系较远.RT-PCR检测IgM在鲈鱼各组织器官的表达情况,其中在头肾及脾脏中表达量最高,心脏、肌肉及脑中几乎不表达.利用已获得的鲈鱼IgM cDNA序列,构建原核表达载体pQE30-IgM,并在M15大肠杆菌中成功诱导表达了分子量为63kD的重组蛋白His-IgM,Western-blotting显示鲈鱼IgM重组蛋白能与鼠源抗6×His的单克隆抗体特异性结合,说明已经获得了基因工程表达IgM重链蛋白.

关键词：鲈鱼、免疫球蛋白M、克隆、组织分布、原核表达

所属期刊栏目：32

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项资助基金21612111;暨南大学引进优秀人才科研启动基金50624065;暨南大学国家级大学生创新创业训练计划项目1210559007

在线出版日期：2013-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：218-223