牙鲆甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的靶基因鉴定

摘要：

为了鉴定牙鲆甲状腺激素受体TRs介导甲状腺激素调控的靶基因,研究采用RT-PCR克隆了TRαA基因的CDS区,并构建了p3×Flag-TRαA重组真核表达载体;该重组质粒转染HEK293T细胞后,RT-PCR、实时定量PCR与Western blot检测均表明牙鲆TRαA在哺乳动物蛋白表达系统中成功转录并翻译;且重组质粒转染的细胞裂解液通过G1亲和层析柱纯化、过滤除菌可得到纯的融合蛋白3×Flag-TRαA,然后双荧光素酶报告实验通过在HEK293T细胞中共转染p3×Flag-TRαA和含候选靶启动子的报告基因表达载体pGL3-Pro-atoh8-1517/1333/708,表明TRαA受体结合在atoh8基因启动子区-1497—-688特异的2个TRE识别序列来调控该基因的转录,即atoh8是TRαA介导甲状腺激素直接调控的靶基因.研究为深入探究甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的信号通路提供了基础依据.

关键词：牙鲆、甲状腺激素、甲状腺激素受体TRαA、靶基因

所属期刊栏目：44

分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：国家自然科学基金41676138

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：275-282