达氏鲟生长激素基因cDNA克隆、表达及免疫荧光定位研究

摘要：

为研究达氏鲟(Acipenser dabryanus)生长激素(Growth Hormone, GH)基因的功能,合成了达氏鲟垂体SMART cDNA,克隆得到GH全长cDNA序列。达氏鲟GH全长cDNA序列为1008 bp,由52 bp的5′端非编码区(Untranslated region, UTR)、编码214个氨基酸的645 bp开放阅读框(Open reading frame, ORF)和311 bp的3′UTR构成。运用GH氨基酸序列构建进化树分析发现,达氏鲟与两栖类、爬行类和哺乳类的一致性要高于真骨鱼类。实时荧光定量PCR结果表明,达氏鲟GH mRNA主要在垂体和下丘脑中表达,且垂体中GH的表达量约为下丘脑的110倍； Western-blot研究结果与qRT-PCR一致,仅在垂体和下丘脑中检测到生长激素蛋白,且垂体中GH的表达量远高于下丘脑。免疫荧光定位结果显示, GH主要定位于垂体中部,下丘脑中也有少量荧光信号；苏木精-伊红组织切片染色研究表明, GH主要是由嗜酸性的生长激素分泌细胞分泌。研究为深入研究脊椎动物生长激素基因的进化和人工养殖达氏鲟的生长调控提供了基础。

关键词：达氏鲟、生长激素、qRT-PCR、Western-blot、荧光免疫组化

分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：国家高技术研究发展计划项目课题一2011AA100401;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目2013JBFZ01;国家自然科学基金青年科学基金项目31001104

在线出版日期：2015-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：307-314