大鲵铁蛋白重链FTH基因的克隆、鉴定及表达分析

摘要：

从大鲵皮肤cDNA文库中,筛选出大鲵铁蛋白重链AdFTH的cDNA序列,其全长为864 bp,开放阅读框为531 bp,编码176个氨基酸,5′和3′非翻译编码区(Untranslated region, UTR)分别为120 bp和214 bp,预测蛋白质的分子量为20.6 kD,理论等电点PI为5.41,预测蛋白无信号肽及跨膜结构,在5′-UTR的22-51 bp处有一个特殊的铁反应元件(Iron response element, IRE)。同源性和系统进化分析表明,铁蛋白重链在进化上有着较高的保守性。实时定量PCR结果表明,大鲵铁蛋白重链mRNA在各个组织中广泛表达,其中肝脏的表达量高于其他8种组织,表明肝脏是大鲵主要的参与铁储存代谢的器官。成功构建了大鲵铁蛋白重链的重组表达载体pET32a-AdFTH,利用大肠杆菌Escherichia coli BL21表达系统和Ni2+亲和层析方法,获得了纯度较高的重组大鲵铁蛋白,并证实重组大鲵铁蛋白(Recombinant AdFTH protein, rAdFTH)具有氧化和吸收铁离子的功能,为进一步制备AdFTH抗体了解其在大鲵体内的多种作用机制打下坚实的基础。

关键词：大鲵、铁蛋白重链、序列分析、原核表达、组织分布

分类号：786

资助基金：陕西省科技攻关2012K01-18;西北农林科技大学基本科研业务费专项QN2011062;西北农林科技大学后稷学者支撑计划Z11021007

在线出版日期：2014-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：27-34