鲫鱼酸性磷酸酶酶学特性及不同效应物对酶活力的影响

摘要：

经NaAc-HAc缓冲液(pH5.0)抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀,DEAE-32离子交换层析,SephadexG-150凝胶过滤纯化,从鲫鱼内脏中分离纯化出电泳纯的酸性磷酸酶.该酶提纯倍数为30.82,比活力195.06U/mg.研究表明,该酶催化对硝基苯磷酸二钠水解反应,最适pH 4.8,pH小于4和大于7时不稳定;最适温度45℃,温度高于50℃不稳定;米氏常数为0.23 mmol/L,利用SDS-PAGE测定酶亚基分子量为33.3 kD.化学修饰剂SUAN、PMSF、DTT、NBS对该酶活力影响不大,BrAc和IAe有明显抑制作用.金属离子对该酶催化活力有不同影响,Na~+、K~+、Ni~(2+)、Co~(2+)影响不显著,Mg~(2+)、Ca~(2+)、Ba~(2+)、Mn~(2+)有激活作用,Ag~+、Cu~(2+)、pb~(2+)、Cd~(2+)有抑制作用,其中Mg~(2+)、Ca~(2+)、pb~(2+)、Cd~2对鲫鱼酸性磷酸酶荧光光谱的影响表明金属离子对酶活力的影响与酶构象改变有关.

关键词：酸性磷酸酶、纯化、酶学性质、化学修饰、金属离子、鲫鱼

所属期刊栏目：34

分类号：Q556(酶)

资助基金：成都市科技局05GGSF220

在线出版日期：2010-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：394-401