狗源性DNA检测试剂盒的研制与评价

摘要：

本研究旨在研制一种快速鉴定肉制品中狗源性成份的DNA检测试剂盒,并对此试剂盒做出方法学评价.以改良SDS-PK法提取狗肉及掺假肉品种(狐肉、貂肉)基因组DNA,选择具有种属特异性的线粒体细胞色素B基因作为鉴定靶基因,应用Primer5.0设计特异性引物,建立狗源性DNA检测方法,组装狗源性DNA检测试剂盒,并进行特异性、稳定性及重复性评价.结果 表明,本试剂盒可有效检测肉制品中狗、狐、貂源性成分,DNA提取效率高,仅0.05 g肉样即可提取浓度高于100 ng/μ L的基因组DNA,OD260/280处于1.80～2.00之间,最低检测限为10-4 ng/μL,所有检测步骤可在4.5 h内完成,操作简便,特异性高.试剂盒所采用试剂安全无毒,反复冻融20次后仍然有效,可于-20℃保存一年.随机抽取12份市售样品进行检测,有3份样本中存在狐、貂肉冒充狗肉现象,掺假率高达25％,该结果与长春食品药品检验中心检测结果一致.狗源性DNA检测试剂盒灵敏性高、特异性强,检测结果准确稳定,具有良好重复性,适用于狗肉快速定性检测.

关键词：狗源性、试剂盒、改良SDS-PK法、线粒体细胞色素B

所属期刊栏目：41

分类号：TS254.9(食品工业)

资助基金：吉林省科技发展计划项目20190301014NY,20180201023YY,20190304115YY,20190303093SF

在线出版日期：2020-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：208-212