不同酶处理的啤酒酵母蛋白酶解液功能肽组学分析

摘要：

采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-HRMS)联用技术,结合PEAKS Online 1.7 肽组学分析软件和Peptide Ranker、BIOPEP数据库,分析比较了啤酒酵母的中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解液的肽指纹谱图和活性肽差异,旨在探究不同酶处理的啤酒酵母蛋白酶解液的肽组学差异.PEAKS Online采用de novo测序,相较于传统数据库,更全面地分析得到五肽及其以下寡肽,使样品中的肽段数据更加完整.实验在中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的最佳酶解工艺下制备得到啤酒酵母蛋白酶解液,然后进行UHPLC-HRMS分离鉴定及数据检索和分析.研究结果表明,中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的酶解产物中分别鉴定出 7221 和 7062 条多肽,其中共有肽为 980 条,而特有肽分别为 6241 条和 6082 条,说明两种不同蛋白酶降解产物的肽指纹谱图有很大的差异.使用Peptide Ranker预测出中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶解产物中有 3013 和 3095 条肽为潜在活性肽,其占比分别为 41.73%和43.83%.搜索BIOPEP数据库发现,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶解产物中有 295 条和 357 条活性肽,其中主要是血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽、二肽基肽酶Ⅳ抑制肽和抗氧化肽.比较发现,木瓜蛋白酶产物中活性肽数量高于中性蛋白酶产物,但是活性肽的相对含量低于中性蛋白酶产物,本研究更好地揭示了不同蛋白酶对啤酒酵母蛋白肽产品组成的影响.上述结果为啤酒酵母蛋白肽的功能产品开发和啤酒酵母资源的高值化利用提供了参考.

关键词：超高效液相色谱-高分辨质谱、肽指纹谱图、活性肽、啤酒酵母

所属期刊栏目：41

分类号：O658(分析化学)

在线出版日期：2023-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：995-1001