高效液相色谱法快速同时检测全血中两种免疫抑制剂
环孢素A和西罗莫司是许多器官移植手术中广泛使用的免疫抑制剂,且一起使用时会产生协同效应,但这两种免疫抑制剂的治疗窗口都非常窄,仅在特定的血药浓度范围内有预期的治疗效果.因此,快速同时检测全血中这两种免疫抑制剂的浓度,可为患者器官移植手术后的给药方案提供有价值的信息.该工作首先考察了环孢素A和西罗莫司在生物液相色谱柱和传统液相色谱柱上的色谱行为,然后基于生物液相色谱柱,建立了可快速分离和检测全血中环孢素A和西罗莫司的高效液相色谱分析方法.全血样品经样品前处理后进样分析,采用ZORBAX 300SB C8柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm)进行分离,以乙腈-水(70:30,v/v)为流动相进行等度洗脱,柱温为60℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为205 nm和278 nm,进样量为20μL.结果表明,环孢素A和西罗莫司在6 min内可实现较好的分离;环孢素A和西罗莫司在各自的浓度范围内具有良好的线性关系(r>0.997),检出限(S/N=3)分别为10 ng/mL和1 ng/mL,定量限(S/N=10)分别为30 ng/mL和2 ng/mL,3个水平的平均加标回收率分别为83.5%~89.7%和95.8%~97.8%,相对标准偏差(RSD)分别为3.2% ~9.0%和3.4% ~6.7%(n=5).该方法操作简便,流动相简单,分析时间短,线性范围宽,灵敏度高,可用于全血中环孢素A和西罗莫司的含量检测.
高效液相色谱、免疫抑制剂、环孢素A、西罗莫司、生物液相色谱柱
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O658(分析化学)
2023-02-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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