超高效液相色谱-串联质谱法定量分析尿液中色氨酸及其代谢产物
基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)建立定量分析色氨酸(Trp)及代谢产物3-OH-犬尿氨酸(3-OH-Kyn)、3-OH-邻氨基苯甲酸(3-OH-AA)、黄尿酸(XA)、犬尿氨酸(Kyn)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、犬尿喹啉酸(KA)和5-羟色胺(5-HT)的方法,应用该方法分析其在尿样中的含量,探讨排泄规律.将尿样稀释、离心后,加入丹磺酰氯(DNS-Cl)衍生,经Thermo C18色谱柱(50 mm×3 mm,2.7μm)分离和0.1%甲酸和甲醇梯度洗脱后,采用电喷雾电离(ESI)源,在正离子扫描和多反应监测(MRM)模式下检测.以咖啡酸(CA)为内标,定量分析.结果显示,8种目标化合物的线性关系良好,相关系数(R2)≥0.9740,检测灵敏(LOD为0.005~0.5 ng/mL),回收率高(93.24%~107.65%).采用本方法检测分析了健康志愿者70个尿液样本,在尿样中检测到Trp原型及其7种代谢产物.结果表明,体内的Trp是通过原型和代谢两种方式排泄:Trp原型的含量为5.22~20.88μg/mL;尿液中经代谢后排泄的Trp量是原型的124%~268%,即体内的Trp主要经代谢后排出体外.方法主要研究了Trp-5-HT和Trp-Kyn两条途径的代谢产物含量,Trp经Kyn降解生成的3-OH-AA和3-OH-Kyn含量较多,即Trp-Kyn是体内Trp的主要代谢途径.方法通过UPLC-MS/MS实现了尿液中Trp及其代谢产物含量的检测,能为临床检查提供技术和理论支持.
超高效液相色谱-串联质谱、柱前衍生、色氨酸-犬尿氨酸代谢途径、尿液
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O658(分析化学)
吉林省教育厅项目;吉林省中医药管理局项目;大学生创新创业训练计划
2021-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
518-525