柱前衍生-高效液相色谱法同时测定血清中氨基酸类及单胺类神经递质
以邻苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)为衍生试剂,建立了柱前衍生-高效液相色谱(HPLC)同时测定血清中氨基酸类神经递质牛磺酸(Tau)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)和单胺类神经递质多巴胺(DA)含量的分析方法.血清与乙醇以1∶2的体积比混合,进行蛋白质沉淀后离心,取其上清液,氮吹至近干.前处理后的样品与OPA进行柱前衍生,衍生化产物采用Luna 5u C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以柠檬酸-乙酸钠缓冲溶液(pH 3.73)为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为338 nm.5种神经递质在各自范围内线性关系良好(r2≥0.986 6),检出限为0.10~0.40 μmol/L,不同加标水平下目标物的加标回收率为87.57%~115.31%,相对标准偏差均低于7.80%.方法 操作简单,灵敏度高,精密度、线性关系和回收率等方法学指标较好,可实现血清中氨基酸类及单胺类神经递质的同时检测.
高效液相色谱、柱前衍生、氨基酸类神经递质、单胺类神经递质、邻苯二甲醛、血清
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O658(分析化学)
国家自然科学基金;河北大学校内人才培养科研项目
2020-11-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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