期刊专题

10.3724/SP.J.1123.2016.01006

多层面验证共培养微环境诱导法诱导骨髓间充质干细胞心肌样分化

引用
为了多层面探讨共培养微环境诱导法定向诱导骨髓间充质干细胞( MSCs)心肌样分化的可行性,取第3代MSCs与原代心肌细胞( CMs)进行共培养。在显微镜下观察诱导1周后的 MSCs 形态学变化,用免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链式反应( RT-PCR)分别检测诱导的 MSCs 中心肌肌钙蛋白 I( cTnI)、α-肌动蛋白(α-actin)、Nkx-2.5和 GATA-4的基因表达变化情况。采用超高效液相色谱-串联质谱( UPLC-MS/MS)分别检测诱导组和对照组的代谢产物。诱导1周后的 MSCs形态呈心肌样改变,cTnI、α-actin、Nkx-2.5和 GATA-4的基因表达均明显升高,正交偏最小二乘法判别分析( OPLS-DA)模型显示诱导的 MSCs 代谢物向 CMs 转变趋势明显。通过多元和单元统计分析筛选差异变量,根据一级质谱和二级质谱比对结果,最终确定12种差异代谢物。与未经诱导的MSCs 相比,经诱导的MSCs与CMs中变化趋势相同的差异代谢物有7种,变化趋势不同的差异代谢物有5种。实验结果表明,无论从形态、基因、蛋白质还是代谢层面看,MSCs 通过与 CMs 间接接触共培养后均发生了心肌样改变,但是与 CMs仍存在差异。

共培养微环境、代谢组学、心肌样分化、骨髓间充质干细胞、心肌细胞

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O658(分析化学)

国家临床重点专科建设项目2011170.@@@@National Key Clinical Specialties Construction Program of China No.2011170.

2016-05-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共8页

414-421

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色谱

1000-8713

21-1185/O6

34

2016,34(4)

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