高效液相色谱法测定糖化酶中葡萄糖苷转移酶的活性

摘要：

建立了糖化酶中葡萄糖苷转移酶活性测定的高效液相色谱方法。以麦芽糖为底物，阿卡波糖为抑制剂，在37℃、pH=4．8醋酸缓冲液介质中葡萄糖苷转移酶作用下将麦芽糖转化为三糖。采用 SUGAR SH1011色谱柱（300 mm×8.0 mm，6μm）分离，以0.01 mol/L硫酸水溶液为流动相，流速0.6 mL/min，用示差折光检测器检测测定三糖的转化量，间接测定葡萄糖苷转移酶的活性。对色谱条件、底物浓度、抑制剂用量及培养时间等条件进行了系统考察。在优化的条件下，三糖在0.1~10 g/L范围内线性关系良好（ r=0.9998），葡萄糖苷转移酶活性检出限和定量限分别为0.013 U和0.043 U，6次平行测定的相对标准偏差（ RSD）为0.63％。在优化条件下测定了不同批次糖化酶中葡萄糖苷转移酶的活性，结果良好。该方法操作简便，稳定性高，可用于葡萄糖生产原料糖化酶中葡萄糖苷转移酶活性的测定。

关键词：高效液相色谱、葡萄糖苷转移酶、活性、三糖、糖化酶

分类号：O658(分析化学)

在线出版日期：2014-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：539-542