金属标记结合高效液相色谱-选择离子监测质谱的蛋白质绝对定量新方法
建立了金属标记结合高效液相色谱-选择性离子监测质谱(SIM)的蛋白质绝对定量新方法。实验考察了金属标记效率、金属标记的稳定性、标记后肽段的色谱保留和质谱行为、新定量方法的线性范围和准确度。实验结果表明金属标记具有标记效率高,稳定性好,色谱保留行为一致等优点。另外,金属标记-选择离子监测质谱绝对定量方法灵敏度高,其定量限低至1 fmol,线性范围为1~500 fmol,线性范围内 R2值大于0.99,具有良好的线性关系;经过测量,标准肽段的回收率为117.01%,说明该方法具有较高的准确度。将该方法应用于腾冲嗜热菌中烯醇酶蛋白的定量分析,相对标准偏差为5.47%,表明该方法的精密度高。以上结果表明该方法可以用于生物样本中的蛋白质的绝对定量分析,为比较简单的生物样本中蛋白质的绝对定量方法提供了一种新的选择。
金属标记、高效液相色谱、选择离子监测质谱、蛋白质、绝对定量
O658(分析化学)
国家重大科学计划项目2012CB910603,2010CB912704;国家高技术研究发展规划2012AA020202;国家重大科学仪器设备开发专项项目2011YQ030139,2011YQ06008408,2011YQ09000504,2012YQ12004407;国家自然科学基金项目20735005,31100591,21275159.
2014-04-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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361-368