反相液相色谱-串联质谱法鉴定油菜蜂花粉中的蛋白质及活性肽

摘要：

基于鸟枪法蛋白质组学分析方法，使用反相液相色谱-串联质谱（RPLC-MS / MS）系统分析油菜蜂花粉蛋白质的胰蛋白酶酶解产物，结合数据库检索，共鉴定到353条肽段。鉴定到的肽段所归属的蛋白质中有239个蛋白质可检索到其分子生物学功能，主要功能为结合活性、酶活性、运输活性、抑制活性等。根据血管紧张素转化酶（ ACE）抑制肽活性与多肽构效之间的关系，从鉴定到的肽段中筛选并适当修饰后得到5条可能具有 ACE 抑制活性的肽段，化学合成肽段后进行了活性验证。结果表明5条肽段均具有良好的活性，其中肽段 AELDIVLALF 和 LAVN-LIPFP 表现出较高的 ACE 抑制活性，半数抑制浓度（ IC50）分别为（10.65±0.50）μmol / L 和（23.66±1.08）μmol / L。该方法速度快，成本低，大大缩短了鉴定周期，达到了高通量筛选生物活性肽的目的。

关键词：反相液相色谱-串联质谱、蛋白质、血管紧张素转化酶抑制肽、油菜蜂花粉

分类号：O658(分析化学)

资助基金：东北特色生物资源综合利用项目2013SYHZ0020．

在线出版日期：2014-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：284-289