利用亲水富集策略分析人血浆中N-糖基化蛋白及N-糖类型
蛋白质的N-糖基化是最重要的翻译后修饰之一,许多已知的血浆肿瘤诊断标志物及治疗靶标都是N-糖基化蛋白.针对血浆的糖蛋白质组研究有利于发现新的蛋白标志物.然而,血浆蛋白质浓度分布的动态范围非常宽,且同一位点上的糖链存在微观不均一性,影响了血浆中糖蛋白的鉴定效率.本文利用亲水材料ZIC-HILIC制备亲水富集柱分别对人血浆中的N-糖链和N-糖肽进行富集,并结合碱性反相色谱进行肽段的预分离和高准确度质谱分析,最终在健康人的血浆中鉴定到了299个糖基化蛋白、637个糖基化位点,并识别出31种不同的糖型.在这些鉴定到的糖基化位点中,新发现有107个N-糖基化位点(占总位点数的16.8%).本方法操作简单,可以有效富集N-糖肽和N-糖,为在血浆中寻找糖蛋白和糖链生物标志物提供了可靠的手段.
超滤辅助样品制备、亲水相互作用色谱、反相色谱、N-糖基化蛋白、N-糖
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O658(分析化学)
国家重点基础研究"973"项目2011CB910603;国家高技术研究发展计划项目2012AA020203;北京市科技新星计划项目Z121107002512014
2013-12-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1057-1063