混合抗体的亲和色谱分离策略

摘要：

乳腺生物反应器可以高效表达重组人单克隆抗体,但是目标产品与乳液原料中的牛抗体性质、结构非常类似,分离难度很大.本文对牛抗体和重组人抗体的种属差异进行了分析,并在此基础上制定了新型分离策略,采取Protein A亲和色谱和免疫亲和色谱来解决混合抗体的分离问题,并讨论了色谱洗脱模式对分离效果的影响.结果表明,Protein A亲和色谱结合梯度洗脱可以有效地纯化得到混合抗体,但是难以彻底分离重组人抗体和牛抗体；相比之下,使用Protein A亲和色谱结合置换色谱模式可以更加高效地分离混合抗体,最终可以得到纯度高达95％以上的重组人抗体,回收率可达95％以上.免疫亲和色谱同样可以有效地分离纯化重组单克隆抗体,且其通用性更强,可以应用于任何动物乳腺表达重组人抗体的分离纯化中.

关键词：Protein A亲和色谱、免疫亲和色谱、重组人抗体、牛抗体、乳腺生物反应器

所属期刊栏目：31

分类号：O658(分析化学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划"973"计划项目2013CB733600,2013CB733604;国家高技术研究发展计划"863"计划项目2012AA021202;国家自然科学基金项目21306207,21275134,3100960;中国计量科学研究院基础科学研究项目21-JB1127

在线出版日期：2013-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：974-979