一步法和两步法毛细管等电聚焦测定蛋白质和多肽等电点的比较

摘要：

利用一步法和两步法毛细管等电聚焦(clEF)方法分离测定了蛋白质和多肽的等电点(pI).讨论了两步法等电聚焦过程所需的溶液组成、样品进样体积、聚焦电压、聚焦时间和分离条件等因素对分离效果的影响.并对一步法和两步法进行了比较.对细胞色素C、血红蛋白、肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白以及6种多肽的分析结果表明:一步法步骤简单,分离速度快,可测定单一组分的pI,也能快速分离混合蛋白和多肽,但分离度较差,且不能同时准确测定各组分的pI;两步法步骤复杂,分析时间较长,但能够同时分离并准确测定混合样品中各组分的pI,所测的pI值与单一组分进行测定的结果基本一致.两种方法可相互结合、互为补充,可广泛应用于两性生物微粒等电点的快速和准确测定.

关键词：毛细管等电聚焦、一步法、两步法、蛋白质、多肽

所属期刊栏目：31

分类号：O658(分析化学)

资助基金：国家自然科学基金项目21175011,20875009;科技部基础研究计划项目2012CB910603;"十二五"农村领域国家科技计划项目2011BAD26B040406

在线出版日期：2013-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：537-542