离子交换色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱分离鉴定中国人乳中的β-酪蛋白

摘要：

以新鲜中国人乳为研究对象,在酸性条件下加氯化钙分离酪蛋白,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定分离效果.从pH值、离心力和CaCl2浓度等3个方面对分离效果进行评价.结果表明:当pH =4.3,离心力为10 400 g,CaCl2溶液浓度为60 mmol/L时,分离得到的酪蛋白组分纯度最高.对所得酪蛋白沉淀进行DEAE阴离子交换色谱分离,得到3个洗脱液.对其中第3个峰进行Western-Blot法及基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱法(MALDI-TOF/TOF MS)鉴定,证明该峰能与人β-酪蛋白抗体特异性结合,确认其为人乳β-酪蛋白；将质谱结果在Mascot数据库中进行数据检索,序列覆盖率为50％,进一步确定其为人乳β-酪蛋白.综上所述,我们建立了能够得到符合蛋白质组学研究要求的人乳β-酪蛋白的方法.

关键词：阴离子交换色谱、质谱、β-酪蛋白、纯化、中国人乳

所属期刊栏目：31

分类号：O658(分析化学)

资助基金："十二五"国家科技支撑计划项目2011BAD09B03

在线出版日期：2013-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：429-434