人神经母细胞瘤的磷酸化膜蛋白质组分析

摘要：

针对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系的磷酸化膜蛋白质组,发展了基于多酶酶解法结合杂化硅胶基质固定化钛离子亲和色谱( Ti4+ -IMAC)整体柱富集的分析策略.该方法通过对细胞裂解液进行超速离心,以及1 mol/LNaC1和0.1 mol/L Na2CO3顺序清洗,获得膜蛋白质组分.所提取的蛋白质分别经胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶平行酶解,产生的肽段经Ti4+ -IMAC整体柱选择性富集磷酸肽后,采用纳升级反相液相色谱分离和质谱鉴定,成功鉴定到43个磷酸化蛋白质,其中有14个定位于膜上.研究结果表明,采用该策略开展SH- SY5Y细胞系磷酸化膜蛋白质组学分析有望加速对该肿瘤的研究和相关潜在标记物的筛选.

关键词：人神经母细胞瘤、磷酸化肽富集、膜蛋白质、多酶酶解、固定化钛离子亲和色谱、有机-无机杂化硅胶整体材料

所属期刊栏目：29

分类号：O658(分析化学)

资助基金：国家重大科学研究计划项目2007CB914100;国家自然科学基金项目20935004;科技部创新方法工作专项项目2009IM031800

在线出版日期：2012-02-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：851-856