高效疏水相互作用色谱法复性与同时纯化重组人Flt3配体的包涵体蛋白质

摘要：

Flt3配体(FL)是一类具有促进早期造血功能的细胞因子,在促进造血细胞生长发育及造血动员方面具有重要的临床应用价值.为了用基因工程方法获得大量用于临床和研究的重组人FL(rhFL)蛋白质,本文对在大肠杆菌(E. coli)中表达得到的Flt3配体的包涵体进行回收、洗涤,溶解于8 mol/L 脲后在高效疏水相互作用色谱(HPHIC)柱上进行rhFL包涵体的复性与同时纯化,并对其保留特征和复性规律进行了研究.结果表明,在连续进样、变性蛋白质质量浓度为8.51 g/L、固定相选用端基为PEG800、流动相添加4 mol/L 脲、1.8 mmol/L 还原型谷胱甘肽(GSH)和0.3 mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSH)、pH 7.0的优化条件下,复性与同时纯化rhFL包涵体的质量回收率为36.9% ,纯度达94.5%以上.本文仅用一步HPHIC法成功地复性与同时纯化了rhFL蛋白质,为获得高活性的rhFL产品奠定了一定的工作基础.

关键词：高效疏水相互作用色谱法、复性、纯化、重组人Flt3配体、包涵体

所属期刊栏目：28

分类号：O658(分析化学)

资助基金：国家自然科学基金项目20705028;陕西省重点实验室项目05JS60

在线出版日期：2010-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：535-540