罗非鱼肌肉乙酰胆碱酯酶的纯化、性质及农药敏感性研究

摘要：

鱼体内乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的变化是水体环境农药污染的重要生物化学标记。以奥利亚罗非鱼（Oreochromisaurea）肌肉组织为材料，研究了乙酰胆碱酯酶的分离纯化方法、性质及杀虫剂对酶的抑制作用。结果表明，当肌肉组织的TritonX-100抽提物采用（Nit4）2SO4分级盐析、SephadexG-100凝胶过滤和DEAE-纤维素DE23离子交换柱层析的分离纯化步骤后，可获得纯化的乙酰胆碱酯酶，酶的比活力达到21．34U／mg，纯化倍数118，回收率22．08％。多因素正交试验分析确定的酶反应条件为反应体系pH7．5，反应温度40℃，反应时间15rain，底物浓度7mmol／L。纯化酶水解碘化硫代乙酰胆碱的速度快，k值为0．229mmol/L，存在过量底物抑制现象。4种杀虫剂（敌敌畏、辛硫磷、三唑磷、灭多威）对罗非鱼肌肉AChE的Ic50值均小于5×10^-6mol／L，有机磷类杀虫剂对罗非鱼脑AChE的抑制能力高于氨基甲酸酯类，抑制能力分别为：敌敌畏〉辛硫磷〉三唑磷〉灭多威。4种农药对罗非鱼肌肉中AChE的抑制具有很好的剂量一效应关系，相关系数均在0．93以上，表明罗非鱼肌肉AChE可以作为水体环境中农药污染的生物化学标记。

关键词：罗非鱼、乙酰胆碱酯酶、生物化学标记

所属期刊栏目：33

分类号：Q556(酶)

资助基金：广东省科技计划项目2011B030800021

在线出版日期：2012-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：120-126