紫草素通过激活活性氧自由基诱导大肠癌细胞的凋亡

摘要：

目的:研究紫草素通过激活活性氧(ROS)自由基诱导大肠癌细胞凋亡的作用机制.方法:通过MTT测定法检测紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力的影响,结合Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Caspase 3/9活性测定试剂盒检测半胱天冬酶活性,使用ROS检测试剂盒检测紫草素处理对HCT116和SW480细胞中ROS水平的影响,并借助Western Blotting检测Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达情况.结果:细胞活力检测结果显示,人正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460对紫草素干预不敏感,而紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力表现出显著的抑制作用(均P<0.05).在紫草素干预后,Western Blotting分析检测到细胞周期蛋白D、c-Myc、Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达水平显著下调(均P<0.05).同时,紫草素以剂量依赖性方式上调了Caspase3和Caspase9蛋白表达水平(均P<0.05).流式细胞术检测结果表明,经10μmol/L紫草素处理24 h后,HCT116和SW480细胞凋亡率增加至59.2％和65.6％,而几乎没有坏死细胞(Annexin V-,PI+);并检测到HCT116和SW480细胞线粒体膜电位被去极化.ROS水平检测结果显示,紫草素以剂量依赖性方式上调了HCT116和SW480细胞ROS水平.结论:紫草素通过线粒体介导途径诱导结肠癌细胞凋亡,Bcl-2蛋白家族和细胞内ROS水平升高在该过程中发挥重要作用.

关键词：紫草素;结肠癌;活性氧;细胞凋亡;细胞增殖;细胞活力;Bcl-2家族蛋白;线粒体

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：河北省医学科学研究重点课题计划项目20191249

在线出版日期：2021-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2316-2321