补肾活血方对人成骨细胞的增殖和分化中p38MAPK 及 PI3K/Akt 信号转导通路的影响
目的:通过观察补肾活血方含药血清对人成骨细胞的增殖分化的影响,研究补肾活血方对 p38 MAPK 和 PI3K/ Akt 信号转导通路的活性相互关联及影响,以探讨补肾活血方临床防治骨质疏松症的作用机制。方法将人成骨细胞株分为空白组(Control 组)、补肾活血方含药血清组( Z组)、含药血清+ p38 MAPK 通路抑制剂 SB203580组( SB 组),含药血清+ PI3K/ Akt 通路抑制剂LY294002组(LY 组)、含药血清+ SB203580+ LY294002组(SB + LY 组),通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT 法)检测成骨细胞的增殖情况,生化方法分析检测成骨细胞碱性磷酸酶( ALP)的活性,采用Western blot 法检测 p38 MAPK 通路磷酸化 p38(p - p38)和 PI3K/ Akt 通路磷酸化 AKT(pAKT)的表达水平。结果补肾活血方含药血清能促进成骨细胞的增殖,使成骨细胞的分化增强,与 Control 组比较差异均有统计学意义(P <0.01);阻断 p38 MAPK 通路后,对成骨细胞的增殖无明显抑制( P >0.05),而阻断 PI3K/ Akt 通路后细胞增殖下降(P <0.01);两条通路对成骨细胞的分化功能均有显著抑制作用(P <0.01);Western blot 结果显示,补肾活血方含药血清能刺激 p - p38和 pAkt 表达,阻断p38 MAPK 和 PI3K/ Akt 信号转导通路后,p - p38含量和 pAkt 明显减少(P <0.01);补肾活血方激活的两条通路之间存在一定的关联性,可互相影响。结论补肾活血方通过 PI3K/ AKT 信号通路调控成骨细胞的增殖,通过同时激活 p38 MAPK 和 PI3K/ AKT 两条信号通路介导成骨细胞的分化,这可能是补肾活血方临床治疗 OP 的作用机制之一。
骨质疏松症、补肾活血方、成骨细胞、p38 MAPK、PI3K/ AKT
R681(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
2011年广东省中医药管理局建设中医药强省课题资助项目20111119
2015-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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