特异性shRNA对小鼠海马神经干细胞中Olig2基因表达的影响

摘要：

目的:构建RNA干扰(RNAi)少突胶质细胞转录因子2(Olig2)基因的小鼠海马神经干细胞(NSCs)体系,用于离体水平研究Olig2对精神分裂症模型海马神经发生的调控作用.方法:海马NSCs原代培养及鉴定;通过荧光显微镜分别观察24、48、72 h后NSCs感染情况,确定慢病毒感染的最佳时间;通过Western Blot筛选有效干扰Olig2的shRNA序列;在NSCs体系中加入浓度为200 μmol/L的MK-801 24 h后,加入有效干扰Olig2的shR-NA,通过Western Blot检测慢病毒感染后的Olig2蛋白表达.结果:慢病毒感染72 h后,海马神经干细胞球荧光表达最强,可达90％;Western Blot结果显示:与对照组比较,Olig2 shRNA3干扰组Olig2的蛋白表达明显降低(P＜0.05);干扰组可明显降低MK-801处理后的NSCs中Olig2蛋白表达(P＜0.05).结论:成功构建RNA干扰Olig2基因的海马NSCs体系,为进一步研究Olig2对精神分裂症后海马神经发生的调控机制奠定了基础.

关键词：海马神经干细胞、RNA干扰、少突胶质细胞转录因子2(Olig2)、小鼠

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资助基金：国家自然科学基金81460214;宁夏高等学校一流学科建设宁夏医科大学西部一流建设学科基础医学资助项目NXYLXK2017B07

在线出版日期：2019-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：283-287