10.16557/j.cnki.1000-7547.2018.03.017
转染基因miR-17-5p对PC12细胞增殖和功能的影响
目的:观察基因miR-17-5p转染对体外培养PC12细胞增殖和功能的影响.方法:用质粒PEGFP-N1-vector空载体和PEGFP-N1-miR-17-5p表达载体转染正常的PC12细胞,将细胞分为对照组、空载组、miR-17-5p组.倒置显微镜观察PC12细胞形态学改变,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期分布,荧光分析法测定儿茶酚胺类(CA)递质的分泌量.结果:显微镜下,空载组细胞形态边缘清晰,细胞贴壁能力强,细胞密度高.miR-17-5p组可见部分细胞有损伤的表现,细胞肿胀圆缩,粘附能力下降,部分细胞裂解成碎片,漂浮于培养基中,细胞密度低.与对照组比较,空载组PC12细胞增殖率、细胞周期分布和CA递质含量无明显变化(P>0.05);与空载组比较,miR-17-5p组细胞增殖率明显降低(P<0.05);细胞处于G1期的百分比明显高于空载组(P<0.01) ,而处于S期、G2的细胞百分比低于空载组(P<0.05);CA分泌量明显降低(P<0.01) .结论:miR-17-5p基因的过表达对PC12细胞的结构和功能有损伤作用,抑制PC12细胞分裂增殖能力和CA分泌功能.
miR-17-5p、PC12细胞、儿茶酚胺、流式细胞术、细胞周期分布
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山东省自然科学基金ZR2013HL065
2018-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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