Aβ1-42诱导的小胶质细胞炎性反应对神经元细胞Mecp2蛋白表达的影响

摘要：

目的:体外研究Aβ1-42诱导的小胶质细胞炎症反应对海马神经元细胞甲基化CpG结合蛋白(Mecp2)表达的影响.方法: (1)用不同浓度的Aβ1-42(终浓度分别为0,5,10,20,30 μmol/L)处理小胶质细胞系(N9) ,24 h后取上清液,ELISA检测每组N9细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-1β的含量,选择合适的Aβ1-42的终浓度.(2)用Aβ1-42 (终浓度为20 μmol/L)及TLR4拮抗剂TAK-242(终浓度为1 μg/ml)处理小胶质细胞系(N9) ,分为3组:正常对照组(con组) 、单纯Aβ1-42处理组(Aβ1-42组) 、Aβ1-42处理后TAK-242干预组(TAK-242组) .24 h后取上清液,ELISA检测每组N9细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-1β的含量.(3) 实验分组同(2) ,24 h后收集培养液,分别干预生长良好的海马神经元细胞系(HT-22) .24 h后,通过Western Blot、免疫荧光染色方法检测每组HT-22细胞中Mecp2蛋白的表达.结果: (1) ELISA结果显示:与con组相比,Aβ1-42处理后,N9细胞分泌的TNF-α、IL-1β的表达量随Aβ1-42浓度的增加而增加(P＜0.05) .(2) ELISA结果显示:与con组相比,Aβ1-42组的TNF-α、IL-1β的表达水平明显提高(P＜0.05);TAK-242组的细胞分泌TNF-α、IL-1β水平较Aβ1-42组显著降低(P＜0.05) .(3) Western Blot结果显示:与con组相比,Aβ1-42组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显增加(P＜0.05);与Aβ1-42组相比,TAK-242组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显减少(P＜0.05) .(4) 免疫荧光染色结果显示:与con组相比,Aβ1-42组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显增强;而与Aβ1-42组相比,TAK-242组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达减弱.结论:Aβ诱导的小胶质细胞发生炎性反应,导致神经元的损伤,可能是由于这种炎性反应使得神经元细胞中Mecp2蛋白的表达量增加,从而损伤神经元.

关键词：Aβ1-42、Mecp2蛋白、小胶质细胞、海马神经元

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资助基金：国家自然科学基金31570845;陕西省自然科学基础重大研究项目2016ZDJC-16 ,国家自然科学基金青年项目81501207

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：365-370