一种改进的大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法

摘要：

目的:改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法,从而获取高纯度星形胶质细胞用于神经科学研究.方法:新生大鼠(2～3日龄),75％酒精消毒后断头,于冰上取大脑皮质置于冰冷的D-Hanks液中,去除脑膜和血管,剪碎后用0.25％胰酶消化并分离细胞,以1×105/ml的密度接种于预铺0.015％多聚赖氨酸的细胞瓶中培养.细胞纯化采用“差速贴壁法”、“梯度血清法”和“十字手摇法”,以获取高纯度星形胶质细胞.通过星形胶质细胞特异性表达蛋白即胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)行免疫细胞荧光染色来鉴定细胞纯度.结果:星形胶质细胞纯度大于98％,可多次传代,细胞增殖快,且生长良好.结论:改进的原代星形胶质细胞培养方法,操作简单,细胞纯度高,能满足各种神经科学研究中对高纯度星形胶质细胞培养的实验要求,适宜推广.

关键词：原代培养、星形胶质细胞、细胞纯化

所属期刊栏目：33

分类号：R74;TQ1

资助基金：宁夏自然科学基金NZ14076;国家自然科学基金31660270,31460255,81360408,81460214

在线出版日期：2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：349-353