shRNA干扰蓝斑核去甲肾上腺素转运体(NET)表达对大鼠抑郁样行为的改善作用

摘要：

目的:探讨利用慢病毒在蓝斑核(locus coeruleus,LC)敲除去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)对大鼠抑郁样行为的影响.方法:构建NET-shRNA慢病毒载体及阴性对照序列,感染PC12细胞后通过Q-PCR和Western Blot方法测定NET mRNA和蛋白水平;建立慢性不可预见性温和应激大鼠抑郁症模型,双侧蓝斑核注射NET-shRNA;3周后采用强迫游泳实验、糖水偏好实验、旷场实验检测大鼠抑郁样行为;Western Blot检测大鼠NET水平;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平.结果:Q-PCR和Western Blot检测结果显示:shRNA-1146沉默效率最高(P＜0.01);与抑郁症模型组相比,蓝斑核注射NET-shRNA组大鼠强迫游泳不动时间减少、糖水偏好率增加、旷场实验得分增加(P＜0.01),蓝斑核NET表达下降(P＜0.01)、NE水平升高(P＜0.05).结论:NET-shRNA慢病毒注射蓝斑核能下调NET的表达,改善大鼠抑郁样行为,为抑郁症的基因治疗提供了实验依据.

关键词：抑郁症、去甲肾上腺素转运体、慢病毒载体、蓝斑核、基因治疗、大鼠

所属期刊栏目：33

分类号：R3 ;R24

资助基金：苏州市科技计划项目SYS201372;江苏省自然科学基金面上项目BK20151197;苏州市重点病种诊疗专项LCZX201316;苏州市精神疾病临床医学中心Szzx201509

在线出版日期：2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：329-335