二次分层离心纯化成年大鼠背根节神经元的方法

摘要：

目的:建立一种长时程的有效获得高度纯化成年大鼠背根节(dorsal root ganglions,DRG)神经元的方法.方法:将SD大鼠的DRG剥膜、消化制成单细胞悬液,牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)分层离心去除大部分非神经元细胞后接种于多聚赖氨酸处理的盖玻片上;培养1d后,胰酶消化再次制成细胞悬液,BSA二次分层离心,再次接种于多聚赖氨酸处理的盖玻片上.BSA二次分层离心后的神经元为实验一(T1组)、单次离心的神经元为实验组二(T2组)、未经离心处理的神经元为对照组(C组).各组除离心次数外,其余各方法相同.相差显微镜下观察上述各组培养神经元,结合βtubulinⅢ免疫荧光组化染色及MTT分析检测神经元纯化效果及细胞活力.结果:培养3d后,T1组神经元比例达88.43±6.13％,较T2组、C组显著增高,差别具有统计学意义(P＜0.05);MTT的结果显示与T2组、C组比较,T1组神经元的相对活力略微下降,但无统计学差异(P＞0.05).结论:二次纯化法是一种简单有效的成年大鼠DRG神经元纯化方法.

关键词：DRG、神经元培养、BSA、离心、纯化、大鼠

所属期刊栏目：32

资助基金：国家自然科学基金资助81130158,81460196,海南省自然科学基金814299,海南省的教育厅科研项目Hjkj2013-32

在线出版日期：2016-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：436-440