大鼠延髓腹外侧A1/C1区儿茶酚胺能神经元的电镜观察—包埋前液氮冻融和Triton X-100组织处理方法的比较

摘要：

目的:比较液氮冻融和Triton X-100不同方法对大鼠延髓腹外侧A1/C1区儿茶酚胺能神经元多巴胺β羟化酶(dopamine-β-hydroxylase,DβH)免疫反应(immunoreactive,ir)标记的影响.方法:实验分组包括:液氮冻融1次组、液氮冻融2次组、0.03％ Triton X-100组、0.05％ Triton X-100组.应用包埋前纳米金-银加强免疫电镜技术,标记延髓腹外侧A1/C1区DβH-ir神经元.结果:光镜下可观察到DβH-ir产物分布于胞体和突起,清晰标记A1/C1区神经元.不同组间DβH-ir神经元数量明显不同:冻融组数量少,突起少且细短;Triton X-100组数量明显增多,突起浓密且长,其中以0.05％ Triton X-100组最为明显,差异显著.电镜结果显示:DβH-ir金-银颗粒主要分布在神经元胞体、树突和轴突终末内,DβH-ir轴突终末与胞体或树突形成密切接触或非对称性突触.金颗粒标记的数量在Triton X-100组明显多于冻融组,这与光镜观察结果相一致.结论:包埋前免疫电镜技术中应用少量Triton X-100处理,可取代液氮冻融,能更好地增加胞膜的通透性,提高抗体的组织渗透能力和特异性标记,是一种较好的包埋前免疫电镜的处理方法.

关键词：多巴胺β羟化酶、免疫电镜技术、液氮冻融、Triton X-100、大鼠

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资助基金：国家自然科学基金31171102,31471097

在线出版日期：2016-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：799-803