GM1联合生长因子诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究

摘要：

目的:探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialoteterahexosyl ganglioside,GM1)联合生长因子(bFGF+ EGF)能否更为高效地促进骨髓间充质于细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为神经元样细胞,从而为细胞替代治疗缺血性脑卒中提供实验依据.方法:采用密度梯度离心法获取骨髓单个核细胞,行原代、传代培养,取第3代BMSCs,用流式细胞术鉴定其表面标志物;同时鉴定其多分化潜能.将第3代BMSCs分四组向神经元样细胞诱导分化,A组:单用(bFGF +EGF);B组:单用GM1;C组:GM1联合(bFGF+ EGF);D组:对照组.分别在正式诱导前后行免疫细胞化学法检测各组细胞Nestin、β-TubulinⅢ、GFAP的阳性表达率并行数据统计分析.结果:流式细胞术鉴定BMSCs表面标志物呈CD29(+)、CD105(+)、CD34(-)、CD45(-);同时其具分化为成骨细胞和成脂细胞潜能.BMSCs诱导为神经元样细胞之前,四组细胞Nestin、β-Tubulin、GFAP表达均呈阴性;诱导2～4d时,A、B、C三组Nestin阳性细胞表达率均呈上升趋势,且C组高于A、B、D组;诱导6～8d时,A、B、C三组Nestin阳性细胞表达率均有所降低,而β-TubulinⅢ、GFAP阳性细胞表达率则呈较明显上升趋势,且C组较A、B组升高明显.综合实验数据,C组Nestin、β-TubulinⅢ、GFAP阳性细胞表达率均高于A、B、D组.结论:GM1联合生长因子(bFGF+EGF)相比单独的生长因子(bFGF+EGF)或GM1,可更为高效地促进BMSCs诱导分化为神经元样细胞.

关键词：骨髓间充质干细胞、GM1、生长因子、诱导、神经元样细胞

所属期刊栏目：31

资助基金：浙江省医学会临床科研基金2013XYC-A73

在线出版日期：2016-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：757-764