转化生长因子β1对缺氧诱导的神经干细胞损伤的保护作用
目的:观察转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)对缺氧诱导的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)损伤是否具有保护作用.方法:取新生1d的大鼠大脑皮质,进行NSCs的分离、培养、传代、诱导分化和鉴定.以三气培养箱(94％N2、5％CO2、1％O2)制备NSCs的缺氧损伤模型.取传代细胞,随机分为4组:正常对照组、三气缺氧组、溶剂对照组、生长因子组.各组细胞在相应时间点用Hoechst33258进行荧光染色,镜下观察、拍照,计算Hoechst染色阳性细胞率,评估三气培养对NSCs的损伤情况以及TGF-β1对这种损伤的保护作用.结果:在未诱导分化前,传代培养的细胞呈Nestin免疫反应阳性;用胎牛血清(fetal bovie serum,FBS)诱导分化后则分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(type Ⅲ beta tubulin,Ⅲ β-tubulin)和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)免疫反应阳性,表明分离到的细胞是神经干细胞.Hoechst33258染色显示,凋亡细胞呈强亮蓝色荧光;正常细胞弥漫均匀着色,无强荧光.与正常对照组相比,三气缺氧组的凋亡阳性细胞显著增多(P＜0.05).与三气缺氧组或溶剂对照组相比,生长因子组的Hoechst33258染色凋亡阳性细胞数显著减少(P＜0.05),但仍明显多于正常对照组(P＜0.05).结论:TGF-β1能够显著减少三气培养法所诱导的NSCs的凋亡,提示TGF-β1对NSCs的缺氧损伤具有重要的保护作用.为深入研究TGF-β1在NSCs的相关临床应用中的潜在价值提供理论基础和实验依据.
神经干细胞、缺氧、细胞凋亡、转化生长因子β1、大脑皮质、大鼠
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国家自然科学基金81171141,徐州医学院院长基金2012KJZ08,江苏省脑病生物信息重点实验室开放课题JSBL0903
2015-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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