稳定过表达Olig2的小鼠胚胎干细胞系的建立

摘要：

目的:建立稳定过表达Olig2的小鼠胚胎干细胞(mESCs)系.方法:从含有Olig2的质粒中利用PCR技术克隆O1ig2基因编码序列,酶切连接入GV218载体,形成Olig2-GV218重组载体.将构建好的Olig2-GV218载体与两种病毒辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,制备并浓缩慢病毒颗粒,侵染mESCs,嘌呤霉素筛选的阳性克隆传代培养10代后鉴定细胞内Olig2的表达.结果:PCR扩增得到含Olig2基因编码序列的特异性条带.重组的Olig2-GV218载体中Olig2编码序列与目标序列几乎一致.携带有Olig2-GV218载体的慢病毒能够正常感染mESCs,表达Olig2-GFP融合蛋白,并稳定遗传.结论:成功建立了稳定过表达Olig2的小鼠胚胎干细胞系.

关键词：小鼠胚胎干细胞、Olig2、过表达

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资助基金：国家自然科学基金81271345,81302519,江苏省自然科学基金BK20131132,BK20130221

在线出版日期：2014-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：425-430