体外培养神经元内JNK/c-jun信号通路对nNOS表达的影响
目的:在中枢神经系统,损伤神经元内通常出现c-jun和nNOS基因的高表达,然而两者之间的关系还不清楚.本实验探讨PC12细胞JNK/ c-jun信号通路对nNOS基因的调控作用.方法:体外培养分化的PC12细胞,免疫组化检测PC12细胞内JNK/c-jun,p-c-jun和nNOS的定位表达;应用SP600125抑制JNK/c-jun信号通路,MTT法检测不同浓度SP600125对分化的PC12细胞活力的影响,Westem blot检测SP600125对JN K/ c-jun,p-c-jun和nNOS基因表达的影响,验证c-jun和nNOS之间的关系.结果:全部分化的PC12的细胞核都表达c-jun基因,部分细胞表达p-c-jun,全部分化的PC12细胞均表达nNOS蛋白.与对照组相比,50 μmol/L和100 μmol/L的SP600125可明显降低细胞活力(P<0.05),50 μmol/L的SP600125能有效抑制c-jun的磷酸化,即p-c-jun的表达(P<0.05),而对c-jun的表达无影响(P>0.05),同时引起nNOS蛋白表达的上调(P<0.05).结论:c-jun,p-c-jun和nNOS蛋白共表达于分化的PC12细胞中,SP600125有效抑制了c-jun的磷酸化激活,JNK/c-jun信号激活的抑制同时上调了nNOS的表达.这些结果表明在分化的PC12细胞内c-jun与nNOS之间的功能密切相关.
JNK、c-jun、神经元型一氧化氮合酶、PC12细胞
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国家自然科学基金81070995,31171290
2013-11-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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